U più propensu à fallimenti è suluzione HPLC

Cum'è un strumentu d'alta precisione, l'HPLC pò facilmente purtà à qualchi prublemi chjuchi s'ellu ùn hè micca operatu in u modu currettu durante l'usu.Unu di i prublemi più cumuni hè u prublema di cumpressione di colonna.Cumu risolve rapidamente un cromatografu difettu.U sistema HPLC hè principalmente custituitu da una buttiglia di reservoir, una pompa, un iniettore, una colonna, una camera di temperatura di a colonna, un detector è un sistema di trattamentu di dati.Per tuttu u sistema, i pilastri, i pumps è i detectors sò i cumpunenti chjave è i lochi principali chì sò propensi à prublemi.

A chjave per a pressione di a colonna hè l'area chì deve esse attente quandu si usa HPLC.A stabilità di a pressione di a colonna hè strettamente ligata à a forma di punta cromatografica, l'efficienza di a colonna, l'efficienza di separazione è u tempu di ritenzione.A stabilità di a pressione di a colonna ùn significa micca chì u valore di pressione hè stabile à un valore stabile, ma piuttostu chì a variazione di a fluttuazione di a pressione hè trà 345kPa o 50PSI (permettenu l'usu di l'eluzione di gradiente quandu a pressione di a colonna hè stabile è cambia lentamente).A pressione troppu alta o troppu bassa hè un prublema di pressione di colonna.

U più propensu à fallimenti è suluzione HPLC

1, alta pressione hè u prublema più cumuna in l 'usu di HPLC.Questu significa una crescita brusca di pressione.In generale, ci sò i seguenti motivi: (1) In generale, questu hè duvuta à u bloccu di u canali di flussu.À questu puntu, duvemu esaminà in pezzi.a.Prima, tagliate l'entrata di a pompa di vacuum.À questu puntu, u tubu PEEK hè statu pienu di liquidu in modu chì u tubu PEEK era più chjucu cà l'buttiglia di solvente per vede s'ellu u liquidu goccia à vuluntà.Se u liquidu ùn hè micca goccia o goccia lentamente, a testa di filtru di solvente hè bluccata.Trattamentu: Soak in 30% acid nitric per una meza ora è risciacqua cù acqua ultrapure.Se u liquidu gocce aleatoriamente, u capu di u filtru di solvente hè normale è hè verificatu;b.Apertura a valvula Purge in modu chì a fase mobile ùn passa micca per a colonna, è se a pressione ùn hè micca significativamente ridutta, a testa bianca di u filtru hè bluccata.Trattamentu: I whiteheads filtrati sò stati eliminati è sonicati cù 10% isopropanol per una meza ora.Assuming chì a pressione cade sottu à 100PSI, a testa bianca filtrata hè normale è hè verificatu;c.Eliminate l'exit end di a colonna, se a pressione ùn diminuite micca, a colonna hè bluccata.Trattamentu: S'ellu hè un bloccu di sali buffer, risciacquate u 95% finu à chì a pressione hè normale.Se l'obstruczione hè causata da un materiale più cunservatu, un flussu più forte di a fase mobile attuale deve esse utilizatu per affruntà versu a pressione normale.Se a pressione di pulizia à longu andà ùn diminuite micca secondu u metudu sopra, l'ingressu è l'outlet di a colonna pò esse cunsideratu cum'è cunnessi à l'instrumentu à u cuntrariu, è a colonna pò esse pulita cù a fase mobile.À questu tempu, se a pressione di a colonna ùn hè ancu ridutta, a piastra di u sieve di l'entrata di a colonna pò esse rimpiazzata solu, ma una volta chì l'operazione ùn hè micca bona, hè faciule per guidà à a riduzzione di l'effettu di a colonna, cusì pruvate d'utilizà menu.Per prublemi difficiuli, a sustituzione di colonna pò esse cunsiderata.

(2) Impostazione di u flussu incorrettu: u flussu currettu pò esse resettatu.

(3) Rapportu di flussu incorrettu: l'indice di viscosità di diverse proporzioni di flussi hè diversu, è a pressione di u sistema currispundenti di u flussu cù una viscosità più altu hè ancu più grande.Sè pussibule, i solventi di viscosità più bassa ponu esse rimpiazzati o ristabiliti è preparati.

(4) Pressione di u sistema di deriva zero: aghjustate u zero di u sensoru di livellu di liquidu.

2, a prissioni hè troppu bassu (1) hè di solitu causatu da leakage sistemu.Cosa da fà: Truvate ogni cunnessione, in particulare l'interfaccia à i dui estremità di a colonna, è stringe l'area di fuga.Eliminate u postu è stringhje o ligna a film PTFE cù a forza approprita.

(2) U gasu entra in a pompa, ma a pressione hè di solitu inestabile in questu tempu, altu è bassu.Più seriu, a pompa ùn serà micca capaci di assorbe u fluidu.Metudu di trattamentu: apre a valvula di pulizia è pulisce à un flussu di 3 ~ 5 ml / min.Se no, e bolle d'aria sò aspirate à a valvula di scarico cù un tubu d'agulla dedicatu.

(3) Nisun flussu di fase mobile: verificate s'ellu ci hè una fase mobile in a buttiglia di u reservoir, se u lavamanu hè immersu in a fase mobile, è se a pompa funziona.

(4) A valvula di riferimentu ùn hè micca chjusa: a valvula di riferimentu hè chjusa dopu a decelerazione.Di solitu scende à 0,1.~ 0.2mL / min dopu à chjude a valvula di riferimentu.

Riassuntu:

In questu documentu, solu i prublemi cumuni in a cromatografia liquida sò analizati.Di sicuru, in a nostra applicazione pratica, scontru più altri prublemi.In a gestione di difetti, duvemu seguità i seguenti principii: cambia solu un fattore à tempu per determinà a relazione trà u fattore ipoteticu è u prublema;In generale, quandu si rimpiazzanu i pezzi per a risoluzione di i prublemi, duvemu attente à mette in u locu e parti intacte dismantellate per prevene i rifiuti;A furmazione di un bonu abitudine record hè a chjave per u successu di a gestione di i difetti.In cunclusioni, quandu si usa HPLC, hè impurtante prestu attenzione à u pretrattamentu di mostra è u funziunamentu propiu è u mantenimentu di l'equipaggiu.